Лабораторная диагностика микозов
Материалом для исследования являются пораженные волосы, чешуйки кожи, кусочки ногтей, кожные и ногтевые соскобы, гной, мокрота, пунктаты лимфатических узлов, костного мозга, внутренних органов, кровь, спинномозговая жидкость, желудочный сок, желчь, испражнения, биоптаты и др. Материал берут стерильными инструментами (пинцетом, скальпелем, иглой, ножницами, ложечкой Фолькмана и т.д.); тампоны для взятия материала не используются. Патологический материал обрабатывают смесью едкого калия с диметисульфоксидом (20 г КОН + 100 мл 60%-го ДМСО). Препараты «раздавленной капли» исследуют под большим увеличением (х40) обычного или фазово-контрастного микроскопа.
У больных микроспорией в лучах люминесцентной лампы пораженные волосы имеют изумрудно-зеленое свечение.
Для диагностики микозов применяется широкий комплекс лабораторных исследований (микроскопический, микологический, аллергический, серологический, генетические методы, биопроба – схема 23).
Схема 23. Лабораторные методы диагностики микозов
Материал для исследования: пораженные волосы, чешуйки кожи, кусочки ногтей, кожные и ногтевые соскобы, гной, мокрота, пунктаты лимфатических узлов, костного мозга, внутренних органов, кровь, спинномозговая жидкость, желудочный сок, желчь, испражнения, биоптаты и др.
Экспресс-диагностика: РИФ, ПЦР
Микроскопический метод: исследование нативных и окрашенных препаратов с целью обнаружения элементов гриба (мицелия, спор)
Микологический метод: посев на специальные питательные среды (Сабуро и др.). Идентификация выделенной культуры гриба на основании характеристики колоний, микроскопического строения гриба, а также по биохимическим и другим признакам.
Серологический метод: определение антител к грибам или их антигенам в сыворотке крови больных микозами с помощью РА, РСК, РНГА, РИФ, ИФА, иммуноблотинга
Аллергический метод: постановка внутрикожных аллергических проб с грибковыми аллергенами
Биопроба: заражение чувствительных животных с последующим выделением чистой культуры гриба
Микроскопический метод играет важную роль в диагностике микозов, т.к. дает возможность быстро выявить в нативных и окрашенных препаратах наличие и расположение клеток, спор гриба и нитей мицелия в патологическом материале. Наиболее часто для окраски грибов применяют общепринятые методы Грама, Романовского-Гимза, Циля-Нильсена, Бурри. Разработан также широкий набор специальных методов окраски грибов.
Экспресс-диагностика микозов осуществляется с помощью прямой РИФ.
Микологический метод (выделение чистой культуры гриба и ее идентификация) является важнейшей составной частью лабораторного исследования при микозах. Посевы производят на специальные плотные и жидкие (неселективные и селективные) питательные среды (среды Сабуро – мальтозо-пептонная, сусло-агар, Чапека; кукурузный, рисовый, картофельный, кровяной, шоколадный, сердечно-мозговой, угольно-дрожжевой агар и т.д.). Селективные среды содержат антибиотики (левомицетин, стрептомицин, пенициллин и др.), красители (бенгальский розовый и др.) или дезинфицирующие вещества. В отличие от слабощелочных сред для выращивания большинства бактерий, среды для культивирования грибов имеют кислую или слабокислую рН (5,7-6,8).
Для первичной дифференциации грибов разработан агар CHROM с хромогенными субстратами, расщепляющимися ферментами грибов с образованием окрашенных соединений, в результате чего колонии различных видов грибов окрашиваются в разные цвета – красный, желтый, белый, кремовый, коричневый, черный и т.д.
Культивирование грибов осуществляют обычно при температуре 22-28 0 С в течение 2-4 недель. Идентификацию выделенной культуры гриба проводят на основании характеристики колоний (внешний вид, форма, консистенция, цвет), микроскопического строения гриба (строение мицелия, форма и расположение конидиеносцев и конидий – спор), а также по биохимическим и другим признакам.
Серологический метод – определение антител к грибам или их антигенам в сыворотке крови больных микозами с помощью РА, РСК, РНГА, РИФ, ИФА, иммуноблотинга
Аллергический метод – постановка внутрикожных аллергических проб. Проводят с грибковыми аллергенами, представляющих собой взвеси из убитых грибов, фильтраты обезвреженных нагреванием культур, полисахаридные и белковые фракции клеток гриба. Результаты аллергических проб учитывают через 20 мин (немедленные) и через 24-48 ч (замедленные реакции).
Для выявления грибковой сенсибилизации организма также применяют иммунологические тесты in vitro (дегрануляция базофилов как тест гиперчувствительности немедленного типа, а для выявления гиперчувствительности замедленного типа — реакцию торможения миграции лейкоцитов или бласттрансформации лимфоцитов).
Биопроба — заражение чувствительных животных (мыши, крысы, хомяки, кролики, морские свинки, собаки, кошки) различными способами (накожно, внутрикожно, подкожно, внутримышечно, внутрибрюшинно, внутривенно, внутрисердечно, интрацеребрально, перорально, интратрахеально) для выделения чистой культуры гриба.
Гистологический метод направлен на обнаружение гриба в тканях, полученных при биопсии и аутопсии.
Генодиагностика. Разработана ПЦР для выявления в материале от больного специфических фрагментов ДНК грибов, позволяющая выявить около 40 видов грибов, в том числе Candida albicans и ее варианты, Т. rubrum и С. neoformans, различные виды Aspergillus, возбудителей паракокцидиоидомикоза (Paracoccidioides brasiliensis) и гистоплазмоза (Histoplasma capsulatum).
Источник
Диагностики микоза
Микоз – заболевание, вызванное патогенными или условно-патогенными грибками. Обычно возникает на фоне иммунодефицита. Может поражать как внешние покровы тела, так и внутренние органы.
Существует несколько методов диагностики микоза. Некоторые из них могут применяться не только для постановки диагноза, но и с целью определения чувствительности возбудителя к антимикотикам. Выбор метода обследования осуществляет врач-дерматолог. Он ориентируется на предполагаемую локализацию патологического очага и анатомическую доступность необходимой зоны. Чтобы обнаружить и подтвердить наличие микоза, используются визуальный осмотр, микробиологические, серологические, молекулярные или лучевые способы обследования.
Виды диагностики микоза
Показан при диагностике грибковых процессов, локализованных на поверхности кожи. Для выявления микоза открытых участков тела порой хватает осмотра невооруженным глазом. При наличии очагов болезни на волосистой части головы используется лампа Вуда. Последняя представляет собой источник ультрафиолетового свечения с длиной волны менее 400 нм. Позволяет выявить характерные признаки грибкового поражения кожи, в т. ч. микрошелушение.
Для подтверждения данных, полученных при осмотре, нужна микроскопия – исследование соскоба пораженной зоны под микроскопом. Для приготовления препарата используются слущенные частицы кожи, мелкие кусочки ногтей, волосы. Изучение биоматериала позволяет увидеть споры и мицелий, установить факт грибковой природы болезни. Выявить разновидность возбудителя удается не во всех случаях. Важное условие точности микроскопического осмотра – отмена противогрибковых лекарств за 10 дней до забора пробы.
Считается основным способом выявления внутренних микозов, однако может использоваться и для диагностики грибка кожи. Суть метода заключается в посеве биосубстрата на питательную среду. Это позволяет увеличить колонию возбудителя в несколько раз, подтвердить факт его наличия, установить вид и чувствительность патогена к тому или иному лекарственному средству. Главный недостаток микробиологического способа – его длительность. Тестирование может занимать от 2-3 дней до 8 недель.
В качестве биологического субстрата используются кровь, моча, ликвор, бронхоальвеолярный лаваж и другие биологические жидкости. Важно, чтобы за 7-10 суток до взятия биоматериала пациент прекратил прием антимикотиков. В противном случае высока вероятность ложноотрицательного результата исследований. Способ подходит для выявления всех грибковых процессов в анатомических зонах, с которых технически возможно получить смывы.
Микробиологические методы занимают много времени, поэтому не могут использоваться для обследования пациентов с острыми формами заболевания. Чтобы ускорить диагностику, применяются серологические способы выявления возбудителя. Они прекрасно подходят для выявления инвазивных микозов на ранних этапах развития, не требуют проведения травмирующих манипуляций для забора биосубстрата, обладают высокой точностью. К сожалению, специфические серологические тесты разработаны только для инвазивного аспергиллеза, криптококкоза, некоторых эндемичных грибковых инвазий.
В основе серологической диагностики грибковых заболеваний лежит обнаружение в крови специфических антител, которые продуцируются иммунной системой в ответ на проникновение той или иной разновидности возбудителя. Точность метода может быть снижена у пациентов, страдающих СПИДом. Их организм практически полностью теряет способность синтезировать антитела. Чувствительность возбудителя к лекарствам с помощью серологических тестов не определяется.
На сегодняшний день продолжается изучение возможности использовать молекулярные методы диагностики для выявления грибковых заболеваний. Разработаны праймеры к различным возбудителям, появилась возможность использовать в качестве биосубстрата не только кровь, но и другие биологические жидкости. Тест позволяет как подтвердить наличие патогенной флоры фактически, так и определить ее точное количество в очаге. Анализ занимает 1-3 дня, в зависимости от загруженности лаборатории и используемого оборудования.
В основе молекулярных диагностических тестов лежит многократное увеличение сверхмалых фрагментов ДНК исследуемого микроорганизма в ходе полимеразной цепной реакции. Основной недостаток ПЦР-тестов – узкая специфичность. Чтобы назначить это исследование, врач должен точно знать, на наличие какой разновидности грибковой флоры он хочет проверить пациента.
Запись на диагностику микоза
Раннее выявление грибковых заболеваний даст Вам возможность избавиться от патологии в короткие сроки и не допустить осложнений.
Узнать подробности проведения процедуры, цены диагностики микоза и записаться на консультацию специалиста Вы можете по телефону:
Источник
Грибковые заболевания (грибок, микоз, кандидоз) кожи и ногтей
В отделении дерматологии «Международного центра охраны здоровья» проводится диагностика и подбор терапии микозов кожи.
Грибковые болезни кожи (дерматомикозы) представляют собой инфекционные болезни кожи, вызываемые грибами. В настоящее время описано около 50 видов патогенных грибов для человека. С медицинской точки зрения (в дерматологической практике) интерес представляют три вида — дерматофиты, дрожжеподобные грибы и плесени.
Этиология: грибы могут поражать роговой слой, придатки кожи, слизистые оболочки полости рта и половых органов, дерму, гиподерму, а также другие глубокие ткани.
Развитие грибковых поражений кожи обусловлено: патогенностью и вирулентностью возбудителя, состоянием макроорганизма, условиями внешней среды.
Диагностика
Диагноз грибкового поражения кожи, в подавляющем большинстве случаев, должен быть подтверждён лабораторными методами исследования:* микроскопическим, * культуральным , *редко гистологическим , * иногда люминесцентным.
Классификация дерматомикозов
Классификация № 1
Выделяют 4 группы микозов и группу псевдомикозов.
Микозы:
1) кератомикозы (разноцветный лишай)
2) дерматомикозы (эпидермофития, трихофития, микроспория, фавус)
3) кандидоз
Псевдомикозы: эритразма, актиномикоз
Классификация № 2
1. микозы, обусловленные дерматофитами:
* микоз волосистой части головы (трихофития, микроспория, фавус)
* микоз бороды и усов
* микоз гладкой кожи (рубромикоз, трихофития, микроспория, фавус)
* микоз крупных складок тела
* микоз стоп
* микоз кистей
* микоз ногтей («грибок ногтей»)
2. микозы, обусловленные дрожжеподобными грибами:
* поверхностный кандидоз
* кандидоз слизистых оболочек
* кандидоз углов рта
* интертригинозный кандидоз (дрожжевая опрелость)
* кандидозные паронихия и онихия
* отрубевидный (разноцветный) лишай
3. микозы, вызываемые плесневыми грибами
Основные рекомендации по лечению микозов
1. лечение грибковых болезней надо проводить только после лабораторного подтверждения диагноза
2. при поражении кожи используется любое противогрибковое средство для наружного применения 1-3 раза в день до исчезновения клинических проявлений, затем 1 раз в день в течение 2-4 недель для профилактики рецидивов заболевания.
3. при поражении придатков кожи используют общую терапию
4. обязательно проведение профилактических мероприятий
Профилактика микозов
—выявление источников инфекции
—ликвидация путей распространения инфекции
—профилактическая и санитарно-просветительная работа
Лечение грибковых заболеваний кожи и ногтей сложный и трудоёмкий процесс. Не пытайтесь заниматься самолечением. Лучше обратитесь к специалистам. Ознакомиться с полным перечнем услуг и узнать цены на них, вы можете в соответствующем разделе сайта.
Источник